ICS
11.220
B41
NY
中华人民共和国农业行业标准
NY/T 681-2003
鸡  传  染 性  贫  血  诊  断  技 术
Diagnostic techniques for chicken infectious anemia
2003-07-30发布
2003-10-01实施
中华人民共和国农业部
发  布
NY/T 681-2003
前  言
本标准的附录 A为规范性附录。
本标准由农业部畜牧兽医局提出并归口。
本标准起草单位:农业部兽医诊断中心。
本标准主要起草人:王宏伟,吴清民,田克恭,陈西钊,苏敬良,王传彬。
NY/T 681-2003
鸡  传  染性  贫  血  诊  断  技 术
1
范围
本标准规定了鸡传染性贫血 (CIA)的临床诊断、CIA 病毒的分离与鉴定、酶联免疫吸附试验和免疫
酶试验等诊断技术。
本标准适用于 CIA 的诊断。
2
临床诊断
2.1
临床症状
2.1.1
CIA 的主要临床特征是贫血。病鸡表现精神萎靡,虚弱,聚堆及行动迟缓,羽毛粗乱,喙、肉髯、
面部和可视黏膜苍白,羽部有出血病灶,生长不良,排白稀粪。
2.1.2
产蛋种鸡感染无临床症状,产蛋率、受精率和孵化率均不受影响,但可通过种蛋传播病毒。
2.1.3
当有马立克氏病、传染性法氏囊病等免疫抑制性疾病发生时,雏鸡对鸡传染性贫血病毒
(CIAV)的易感性增高,发病早且严重。
2.2
病理变化
2.2.1
病鸡表现再生障碍性贫血,消瘦,骨髓发白,肌肉及内脏器官苍白,肝脏、肾脏肿大并褪色,血液
稀薄,凝血时间延长。
2.2.2
病鸡表现全身性淋巴组织萎缩,胸腺、法氏囊、脾脏和盲肠扁桃体以及其他组织内淋巴细胞严
重缺失。
3
病毒分离与鉴定
3.1
材料准备
3.1.1
试剂
a)
改良最低要素营养液(DMEM)培养基,配方见第 A.1章;
b)
马立克氏病病毒转化的淋巴细胞系 MDCC-MSB1 细胞;
c)
标准阳性血清:用 CIAV 抗原免疫 SPF 鸡获得的血清;
d)
标准阴性血清:无 CIAV 感染的 SPF 鸡血清;
e)
新生牛血清,青霉素,链霉素。
3.1.2
器材
a)
细胞培养瓶;
b)  吸管;
c)
二氧化碳培养箱;
d)
37℃恒温水浴箱;
e)
普通冰箱及低温冰箱;
f)
离心机及离心管;
g)
研磨器械;
h)
普通光学显微镜;
i)
微量加样器,容量5 μL~50 μL,50 μL~200 μL;
j)
0.45
微孔滤膜。
3.1.3
样品